在细胞培养箱中通入二氧化碳的作用是维持培养液中pH值的相对稳定大多数细胞所需pH在7.2- 7.4。但是，细胞培养最适pH值随培养的细胞种类不同而不同.成纤维细胞喜欢较高pH（7.4-7.7），而传代转化细胞系则需要偏酸pH（7.0-7.4）一般培养基中大都使用HCO3-/CO32-/H+作为pH?的缓冲系统，而培养基中NaHCO3的含量将决定细胞培养时应使用的CO2浓度。当培养基中NaHCO3为每升1.97g时，则应使用5%CO2培养细胞。