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诺如病毒诊断标准
作者
ncbauser
来源
国家应急分析测试平台
发布时间
2013-12-25
关键词
诺如病毒;诊断标准
领域
生物领域
正文
诺如病毒的实验室检测 1. 直接电镜检查 由于诺如病毒在电镜下缺乏显著的形态学特征, 且敏感性低、技术条件要求高,不适于大规模流行病学调查。 2. 免疫电镜检查 在发病初期粪便带毒量达106~ 107copies / ml时即可应用免疫电镜技术,其敏感度高于普通电镜 10~ 100倍。该技术需用病人恢复期血清,检出率受检测人员的技能和经验影响。 3. 放射免疫法和生物素-亲和素免疫法 放射免疫法的灵敏度比免疫电镜法高10~ 100倍, 可检测出抗体升高的水平,为流行病学提供更有参考价值的资料。放射免疫法的不足之处是需时较长, 且需要放射性核素标记。为了简化方法,美国疾病预防与控制中心 (CDC)建立了生物素- 亲和素免疫法, 其灵敏度与RIA法相当, 目前已成为美CDC检测NLV抗原和抗体的标准实验方法。 4. ELI SA方法 ELISA方法应用最为广泛,目前可以直接检测病人血中特异性IgG抗体。患者急性期(发病5天内)和恢复期(发病3~ 6周)双份血IgG抗体滴度出现4倍增长,可以确定诊断。 5. 核酸杂交技术RT-PC方法 既可做临床病人诊断,也能进行外环境中诺如病毒污染状况调查。这类方法灵敏度很高, 可检测出病毒量在102~ 104copies /ml的标本,但是要特别注意避免实验室污染。 6. 等温核酸扩增法 ( NASBA) 直接扩增RNA来检测 NV, 样品中病原 RNA 得到指数级扩增, 产物通过琼脂糖凝胶电泳或斑点印迹杂交鉴定结果。该方法的灵敏度略低于RT-PCR法;整个过程只有一步RNA扩增, 避免了RT-PCR存在的RNA交叉污染;缩短了操作时间; 假阳性率低。
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