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汉中村民办婚宴多人疑食物中毒

作者
佚名
来源
中国应急分析测试平台
发布时间
2015-12-11
关键词
汉中；食物中毒
领域
生物领域
正文
细菌介绍 肠炎沙门氏菌（Salmonellaenteritidis ）属于无宿主特异性而有侵害性的病原菌之一，宿主包括人和各种动物。该菌不仅能引起家禽发病死亡造成严重的经济损失，而且被污染的家禽产品作为肠炎沙门氏菌的携带者，还严重危害人类健康。据报道，日、美等发达国家发生的食物中毒事件中40%～80%是由禽沙门氏菌引起的，其中主要病原为肠炎沙门氏菌。由肠炎沙门氏菌引起人的急性胃肠炎（食物中毒），在世界各国有增加的趋势，已成为国际公共卫生的一个重要课题。1989年3月世界卫生组织专门召开了一次有关家禽及禽蛋中肠炎沙门氏菌污染问题的紧急国际会议。 构造和分类 1、为脂多糖，性质稳定。能耐100℃达数小时，不被乙醇或0.1%石炭酸破坏。决定o型原特异性的是脂多糖中的多糖侧链部分，以1、2、3等阿拉伯数字表示。例如乙型副伤寒杆菌有4、5、12三个。鼠伤寒杆菌有1、4、5、12四个；猪霍乱杆菌有6、7二个。其中有些o抗原是几种菌所共有，如4、5为乙型副伤寒杆菌和鼠伤寒杆菌共有，将具有共同o抗原沙门氏菌归为一组，这样可将沙门杆氏菌属分为a～z、o51～o63、o65～o67共有42组。已发现26个菌组、161个血清型。使人类致病的沙门氏杆菌大多属于a～e组。o抗原刺激机体主要产生lgm抗体。 2、为蛋白质，对热不稳定，60℃经15分钟或乙醇处理被破坏。具有鞭毛的细菌经甲醇液固定后，其o抗原全部被h抗原遮盖，而不能与相应抗o抗体反应。h抗原的特异性取决于多肽链上氨基酸的排列顺序和空间构型。沙门氏杆菌的h抗原有两种，称为第1相和第2相。第1相特异性高，又称特异相，用a、b、c等表示，第2相特异性低，为数种沙门氏杆菌所共有，也称非特异相，用1、2、3等表示。具有第1相和第2相h抗原的细菌称为双相菌，仅有一相者称单相菌。每一组沙门氏杆菌根据h抗原不同，可进一步分种或型。h抗原刺激机体主要产生lgg抗体。 3、因与毒力有关而命名为vi抗原。由聚-n-乙酰-d-半乳糖胺糖醛酸组成。不稳定，经60℃加热、石碳酸处理或人工传代培养易破坏或丢失。新从患者标本中分离出的伤寒杆菌、丙型副伤寒杆菌等有此抗原。vi抗原存在于细菌表面，可阻止o抗原与其相应抗体的反应。vi抗原的抗原性弱。当体内菌存在时可产生一定量抗体；细菌被清除后，抗体也随之消失。故测定vi抗体有助于对伤寒带菌者的检出。 检测方法 自19世纪后期，沙门氏菌首次被鉴定为人类的一种病原以来，检测方法学都是建立在采取感染病人的粪便或血液作为临床病料的基础上。此后的60年间，用于从食品中分离沙门氏菌的方法实质上与那些用于临床病料的方法是相同的。但至少有三个因素限制了用于临床病料的方法应用在食品分析上。第一，通常，沙门氏菌的含量水平在污染食品中比有感染病人的病料中要低很多；第二，食品本身的性质会干扰病原的检测，例如，某些食品中固有菌群可能处在一个很高的水平，从而影响特定细菌的选择性分离和鉴定；第三，与临床病料不同的是，经过加工的食品，由于加热、干燥、高含盐量、酸和冷冻等因素的作用，其中的沙门氏菌受到了尚不致命的损伤或称“致伤”。这就形成了一个具有不同生长特性的细菌群。这种现象对那些希望从食物样品中分离出沙门氏菌的食品分析家来说有很大影响，因为在选择培养基上直接培养“致伤”的沙门氏菌通常是以细菌死亡和试验失败而告终。为克服这些困难，人们建立了一种简单的微生物增殖步骤，专门针对以食品为传播载体的病原。虽然这些方法本身证明是可靠的，但却很费力、耗时，需要4～7天才能完成。因此，在需要及时、快速评价食品中微生物的安全性时，通常不被采用。随着DNA和抗体技术的发展，近10～15年间发展了无数改进的方法，其中许多可以在48h内检出沙门氏菌，这些方法通称为快速检测。 1、传统的培养方法 用于沙门氏菌分析的传统方法是食物样品分步增菌，以增加病原的可检出率，这种培养方法总体可分4个不同阶段或步骤。第一步（预增菌），将样品加到一种高营养、无选择性的培养基中，温度37℃，使那些“致伤”的细菌复苏及使所有微生物生长。虽然缓冲胨水被建议常规使用（由于其可保持溶液pH值稳定），但对培养基的选择仍存有争论。第二，是选择性增菌步骤，它使沙门氏菌生长而使肉汤中同时存在的微生物数量减少，与预增菌培养基相似，对选择性培养基的选择，也存在许多不同的观点。目前应用的主要有如下3种类型：连四硫基盐肉汤（Tetrathionatebroth）、硒酸盐胱氨酸肉汤（Selenitecystinebroth）和RV（Rappaport-Vassiliadis）培养基。由于没有任何一种培养基可以全面地保持所有食品基质或各种沙门氏菌血清型，所以，较适当的做法就是使用两种培养基平行地进行试验。第三步是分离步骤，即选择性培养物在含一种或多种抑制非沙门氏菌生长制剂的琼脂平板上划线培养，然后对平板上肉眼可见的特征性菌落进行确认，并对该菌落分离物进行一系列生化和血清学检测，以作出鉴定。传统沙门氏菌检测法全过程需时至少4～7天，才能得出明确的诊断结果。 2、以抗体为基础的检测方法 利用抗原-抗体反应的显著特异性，来进行细菌的鉴别和血清学定型，已有半个多世纪的历史。细菌菌体或鞭毛抗原的特异性抗体的存在，使得人们可以建立一些快速方法来检测以食品为载体的病原。已经建立的沙门氏菌免疫学检测方法有许多种，大致可分为以酶标抗体（ELISA），荧光抗体染色（免疫荧光法），同位素标记抗体（放射免疫试验）为基础的方法及其它多种以抗体为基础，利用乳胶凝集、免疫传感器、免疫扩散及免疫色谱技术的方法。但常规中最广泛采用的是以双位点ELISA技术即夹心ELISA为基础的方法。此法改进后用有放射活性的同位素替代标记抗体，概括地说，是指以固定在固体基质上的“捕捉”抗体来捕捉目标抗原，经洗涤除去未结合的成分，加入第二种酶标抗体，此者结合在捕捉到的抗原的不同位点上，第二次洗涤后加入酶作用基质，并令其与颜色成分反应，然后用分光光度法即很容易检测到目标抗原。采用微量滴定板作为固态基质使反应形式标准化，并促成其自动化。 黎兆滚等人首次在国内口岸系统应用微量板ELISA法（Salmonelletest1）对进出口动物产品（鱼粉、肉骨粉等）进行沙门氏菌检测。该法采用预先包被了沙门氏菌（A-E群）单克隆抗体的微量板，加入经增菌处理的样品，反应后再加入一定的指示剂，作用毕后用酶标仪测定OD值来判定结果。食物样品经适当的增菌处理，也可用此法进行沙门氏菌检测。ELISA法检出沙门氏菌的极限范围在105～106个细胞/ml，因此，要得出可靠的结果，食物样品首先必需进行预增菌、选择性增菌，通常还要在含有D-甘露糖的肉汤（M肉汤）中进行后增菌，以促进鞭毛发育。总的来说，标准的ELISA法样品的制备，约需要经过40～48h的孵育才能完成。黎兆滚等人的微量板ELISA法（Salmonellatest1）样品制备过程分三步，共耗时24h：①选用营养肉汤进行预增菌（6h），使“致伤”、冷冻的沙门氏菌复苏。②使用选择性培养基RV进行增菌（14h），使沙门氏菌大量繁殖，同时抑制其它杂菌生长。③使用营养肉汤（蛋白胨水）进行后增菌（4h），使沙门氏菌的数量大大增加。比上述标准的ELISA法样品制备过程缩短了一半的时间。ELISA方法本身，则仅需要大约2h而已（其中30min是操作时间，90min是孵育时间）。相比之下，黎兆滚等人的方法可在27h内完成，比上述方法缩短了一半的时间，颇值得推广应用。最新式的沙门氏菌免疫学检测法，利用经特异性抗体敏化的免疫色谱卡片为基础。几滴样品加到卡片上，结果可以直接用肉眼读出。免疫色谱卡片极易操作，且由于无需要特殊设备，很适合小型实验室使用。尽管卡片检测法与ELISA法一样需要对样品进行增菌处理，但它（卡片法）本身通常需时不超过10min，如果采用黎兆滚等人的样品制备法，则可使操作时间更为缩短。 3、以核酸为基础的方法 细胞核酸DNA和RNA是唯一一类可以携带信息的大分子。由于所有的细胞都含有这种分子，可以利用它作为检测的标靶。标靶通常是一个特异性核酸序列，它可通过以补体核酸分子作为探针来检出。与免疫学方法相似，探针也需要加附适当的标记，如放射性同位素、酶或发光的标识物。Fitts等人在食品沙门氏菌检测中引入了第一代DAN—RNA杂交技术，此法应用的探针含有用放射性同位素标记的伤寒沙门氏菌DNA片段，其敏感性高，经大约48h的增菌步骤后，检测极限可达108个细菌/ml，但由于要使用放射性同位素，只能在专门的实验室应用，此方法的优点都被抵消了。为此，以核酸杂交为基础的第二代技术—比色计目前已发展起来。这种方法依赖于沙门氏菌核糖体RNA（rRNA）—核糖体发育过程中储存的核酸成分的检测。核糖体是细胞蛋白质合成器的一部分，每个细菌细胞中存在5000～20000个复制体，而相比之下染色体DNA复制体仅2～10个。这种天然富含rRNA标靶序列的情况使得用无辐射计检测成为可能，同时又保持了与放射性同位素方法相当或更高的敏感性。其另一优点是由于rRNA为单链（而DNA为双链），杂交前无需经过变性步骤。要得到阳性结果，此法需要105个靶细胞/ml，因此对沙门氏菌检测来说，需要进行预增菌和选择性增菌，总共约50h。rRNA探针法比沙门氏菌ELISA法更耗时，但二者成本相近。食品细菌检测法的最新进展是在化学扩增体系方面的发展，即聚合酶链反应（PCR），用该体系可对制备好的样品进行细菌DNA扩增，以便更易于用诸如凝胶电泳法或比色型ELISA法检测。用于检测沙门氏菌和其它以食物为载体的病原的PCR方法业已建立，其中一些方法显示了极好的敏感性。但该法较难自动化，且必需经选择性增菌以稀释可能干扰检测反应的某些成分。一个完整的以PCR为基础的方法，需要2天才能完成，很大程度上抵销了其高敏感性的优点，但这种方法对那些含沙门氏菌较少或沙门氏菌“致伤”严重难以复苏而仍保有沙门氏菌rRNA的样品尤其有效。 预防措施 第一、不喝未经处理的水，（例如池塘、溪水、湖水、被污染的海水等），不喝未经巴氏法消毒的牛奶（即生牛奶）； 第二、不吃生肉或未经加热煮熟的肉； 第三、便后、换尿布后、接触宠物后，应仔细洗净双手，特别注意在准备食物或就餐前； 第四、生家禽肉，牛肉、猪肉均应视为可能受污染的食物，情况允许时，新鲜肉应该放在干净的塑料袋内，以免渗出血水污染别的食物。处理生肉后，未洗手前勿舔手指，或接触其他食物，或抽烟； 第五、每接触一种食物后，务必将砧板仔细洗净，以免污染其它食物； 第六、特别在使用微波炉煮肉食时，要使肉食内外达到一致的温度（通常是一百六十五华摄氏度以上），可用温度计检查炉内食物的温度值。沙门氏菌感染的治疗包括两个方面：即病因治疗及对症处理。病因治疗就是应用抗生素控制病菌繁殖和消灭病菌。不少沙门氏菌已对种抗生素产生耐药性，尤其是鼠伤寒杆菌。抗生素疗效不理想，给治疗带来较大困难。应选择效果好，副作用少的抗生素。对于年龄小，或病性重的患儿应采用静脉给予抗生素，并同时应用两种抗生素。用药时间应视病情而定，总疗程不应短于2周。也有采用体温恢复正常三天后，抗生至少减量再用1周的疗法。必须注意，在开始时抗生素用量不宜过大，特别是杀灭病菌的抗生素，如短时间内大量细菌死亡反可导致病情恶化，其原因是沙门氏菌可产生内毒素，内毒素存在于菌体内，当细菌被杀灭解体是即放出内毒素时，可使血中的内毒素增加，毒血症加重。 对症处理，也就是护理工作。要注意观察体温的动态变化。必须用体温表，不能用手摸来判定而乱用退热药。一般婴幼儿39度以上，年长儿38.5度以上才应用退热剂。不是高热可饮用温开水，也可发汗降温。高温40度以上时，可用酒精擦身。无酒精时也可用白少酒代替，用等量白酒和温开水，用块小布浸湿生擦颈部、腋下、腹股沟部、肘窝、胸窝、脚心，可使血管扩张散热，有立竿见影的效果。饮食以流食，半流食为主，无渣、少纤维，不油腻又易消化的食物，可防止肠出血，肠穿孔。高热，出汗，呕吐，腹泻时均可失去大量水分，应少量多次喂水。如有脱水表现，呕吐重，难以经口补水，应静脉输液，尿量减少，担示体内已缺水也应补水。还应密切观察病性变化，好转或加重，有无并发症症状的表现，及时发现才能及早处理，注意口腔，皮肤清洁卫生，以防再得其他病菌感染。 目前已有预防菌苗，为伤寒，副伤寒甲、乙三联菌苗，一般皮下注射3次，两次间隔10天，有效期一年，以后尚需每年加强1次，以保证产生有效的免疫力。注意饮食卫生是平时预防的关键，不吃死畜的肉，血和内脏；吃生的蔬菜和水果要洗干净；不吃不合格的市场饮料，并注意剩下的饭菜要冷藏，冷藏时间过久的切勿再吃，超过1天也应再次烧开后食用。 爆发疫情 美国食品和药物管理局20日宣布，随着沙门氏菌疫情在美国多个州持续蔓延，染病人数已上升至1000多人。 该管理局在疫情通报中说，从5月发现首个病例以来，本次疫情已持续两个多月，并且已蔓延至全国，其持续时间之长和蔓延地区之广为多年来罕见。目前全美各地已接到2000多个可疑病例报告，但目前只有约一半。 病例得到确诊，尚未接到死亡报告。 加利福尼亚州卫生部门17日宣布，加州多个地区暴发沙门氏菌疫情，自6月迄今接到266例患病报告。明尼苏达州认定，至少7例病例与鸡蛋有关。美联社报道，其他州沙门氏菌病例猛增。科罗拉多州6月和7月接到28例病例，数量是平时大约4倍。 鼠伤寒沙门氏菌与肠炎沙门氏菌的区别 鼠伤寒沙门氏菌肠炎（简称鼠伤寒）是鼠伤寒沙门氏菌引起的急性传染病。临床表现可分为四型，即胃肠炎型、败血症型、病灶感染型和无症状带菌型 沙门氏菌病是最重要的人畜共患病之一。沙门氏菌属之所以能成为近乎普遍性病原其主要原因是它能适应几乎任何类型的宿主。沙门氏菌污染的食品是人类受感染的一个主要来源。基于血清学检测和细菌分离的沙门氏菌控制计划不仅是为减少感染的流行，而且可以作为一个有价值的工具，改变常规手段来降低食物污染。 肠炎沙门氏菌（SE）是家禽的一种重要病原，已能从肉鸡、种鸡和商品化产蛋鸡群中予以分离。由于细菌间歇性的排泄，故难以对阳性禽进行细菌学鉴定。抗体的存在不都意味着感染，但却是以前曾受感染的指征。 参考资料 1、http://www.chinacdc.cn/dfdt/201508/t20150817_119703.htm 2、http://xian.qq.com/a/20150814/058281.htm 3、肠炎沙门氏菌百度百科（http://baike.baidu.com/link?url=QD3GYTiO_IScKa6qSXSQ3I8MjZJt1-Vs7MbRCOWZOStAAEYXWC6xyV3KiE6gPUeR1C2Kb3ki-CsnNHsurK0L3K） 资料整理人: 程建华 国家生物医学分析中心 校 核 人：董方霆 国家生物医学分析中心

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